(1) PBS:用购自中山公司的PBS粉剂,每袋加ddH2O定容至1000ml,调pH7.2,高压灭菌消毒。
(2) 0.25%胰蛋白酶消化液:使用时浓度为0.25%,含0.02%EDTA,制备时即取250mg胰酶和20mgEDTA溶于100mLPBS溶液,并在无菌操作台上用0.22um一次性过滤器过滤,50ml分装,4℃保存。
(3) 接种液配制:用DMEM-F12 基础培养90%,再加入10%胎牛血清,后按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。
(4) 抗生素:青霉素(80万U)和链霉素(100万U)在无菌操作台内以高压灭菌过的双蒸水溶解分别加入4ml灭菌水/青霉素,5ml灭菌水/链霉素),配制成20万u/ml分装,置于-20℃冰箱保存,临用时4℃解冻,注意尽量避免反复冻融,并使培养基终浓度为100 u/ml。
(5)0.01% L-多聚赖氨酸溶液的配制:称量 10mg L-多聚赖氨酸,溶于 100ml 灭菌去离子水,0.22μm 正压滤器过滤分装,-20℃保存。
(6)0.4%台盼蓝溶液的配制
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