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如何进行细胞的原代培养?
时间:2024-01-11来源:金少源浏览:

  原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,我们通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。

  

  原代细胞因为可以模拟机体的功能,主要用于:生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、癌症药物的研究。

  

  原代细胞对解冻过程非常敏感,因此将小瓶置于37℃水浴锅中,保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶,并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪,以便可以立即用于接种细胞,并置于培养箱中,我们在使用的原代视网膜内皮细胞时,复苏的时候没有去离心,第二天换个液就可以。

  

  原代细胞有间隙抑制接触不良反应,所以细胞不能到达100%的密度的时候传代,一般有效的建议观察细胞的生长周期,的原代细胞在细胞密度达到85%左右的时候传代佳,当生长至100%汇合时,它就会衰老。记住,所有的原代细胞不是100%纯,因此我们要尽量减少污染细胞的生长。

  

  与细胞系不同,原代细胞增殖有限,我们建议尽早使用原代细胞进行实验以防止遗传漂移,如果你正在使用一个增殖困难的细胞类型,你应该密切监测细胞形态,因为少量混杂的细胞(如成纤维细胞)可能随着时间的推移,大量生长从而成为主要细胞。


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