1.单个细胞:取动物胚胎或幼龄动物器官、组织,将材料剪碎,并用胰蛋白酶(或用胶原蛋白酶)处理(消化),形成分散的单个细胞;
2.细胞悬浮液:将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。
3.原代培养:从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。
4.传代培养:当细胞从动植物中生长迁移出来,形成生长晕并增大以后,科学接着进行传代培养,即将原代培养细胞分成若干份,接种到若干份培养基中,使其继续生长、增殖。
5.通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有性质的细胞称为细胞株。
6.当培养超过50代时,大多数的细胞已经衰老死亡,但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变出现了无限传代的特性,即癌变。此时的细胞被称为细胞系。
细胞培养是生物医学研究人员必须掌握的一项基本技能,是实验成功与否的关键。所以,了解细胞培养的基本操作要领,对生物医药科研工作者,特别是对基础研究工作者来说,...
原代培养及其操作步骤 原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度...