Nb2-11大鼠淋巴瘤细胞
T25 细胞到货处理
观察:
收到细胞后,请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液等异常情况。
处理:
1、75%酒精棉球擦拭细胞培养瓶外部。
2、显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40x,100x,200x 各一张)前三天照片为重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。
3、不要打开培养瓶盖,将细胞放入培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。
4、收到细胞后,及时查看说明书是贴壁细胞还是悬浮细胞形态,并按常规贴壁或悬浮细胞的传代方法操作。
5、密度达标就可以传代。前期传代比例1:2,等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管,另外一瓶继续传代,反复冻存2-3只后才扩增做实验,以防突发情况引起断种。
贴壁细胞处理:
未超过 80%汇合度时,更换新鲜培养基放入培养箱培养;超过 80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。首次传代,建议 1:2 传代(两个 T25)。
悬浮细胞处理:
将培养瓶或离心管中的细胞悬液收集至15mL离心管中1000rpm离心5min,加入1-2ml完全培养基重悬,按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至8-10ml/瓶,放入细胞培养箱中培养。