细胞培养是细胞和分子生物学中使用的关键工具。它可以对细胞生理学和细胞生物化学进行建模。此外,细胞培养使研究人员能够确定药物和有毒化合物对细胞反应的影响。那么怎么培养出一批好的细胞呢?细胞培养需要注意什么?
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1、检查培养液颜色与透明度的变化,颜色变黄,说明PH值下降;变红或紫红色,说明PH值上升,细胞生长停滞、死亡,一般生长稳定的细胞2-3天换液一次,生长缓慢的细胞可3-4天换液一次。
2、观察细胞生长状态,细胞长满瓶底的80%,应及时传代。
3、观察细胞形态变化,细胞透明度大、折光性强、轮廓清晰为佳。
4、注意微生物污染,常常出现培养液混浊,液体内漂菌丝或细胞菌,不仅仅指微生物,包括所有混入培养环境中的细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物及细胞。
不同的细胞,培养环境是不同的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞,比如:内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,例如:巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度快,贴壁速度也快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以进行细胞培养的时候应该多探索该细胞喜欢的生长空间密度和生长规律等相关问题,才能培养出理想的细胞。
细胞培养是生物医学研究人员必须掌握的一项基本技能,是实验成功与否的关键。所以,了解细胞培养的基本操作要领,对生物医药科研工作者,特别是对基础研究工作者来说,...
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