原代细胞培养原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。例如,用从手术中切除的肿瘤细胞进行原代培养,然后用该培养细胞进行抗癌药物的筛选,根据肿瘤细胞对加入的化疗药物的敏感性来帮助选择有效的化疗方案,有可能起到增强疗效、降低副作用的作用。
(四)原代细胞的传代、保存(1)传代:依椐细胞的生长状态,生长的细胞1:2或1:3进行传代。(2)保存:DMSO+培养液+血清按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃ 过夜)→液氮。(五)原代细胞的复苏(1)取出细胞,迅速放入37℃温水中快速解冻。(2)吸出细胞悬液,并加10倍以上培养液。(3)用培养液适当稀释后接种培养瓶,放入37℃ CO2 培养箱静置培养。
细胞培养是生物医学研究人员必须掌握的一项基本技能,是实验成功与否的关键。所以,了解细胞培养的基本操作要领,对生物医药科研工作者,特别是对基础研究工作者来说,...
原代培养及其操作步骤 原代分离细胞培养是指从供体内取出组织后,经机械以及消化分离成单个细胞或单一型细胞群,使之在体外模拟人体生理环境,在无菌、适当温度...